石蜡包埋组织单细胞样品制备方法存在的问题

石蜡包埋组织单细胞样品制备方法存在的问题

石蜡包埋组织单细胞制备方法的建立，使流式细胞术在肿瘤研究中得到更加广泛的应用。主要存在如下问题。

   1、样品中的碎片较多，所获得的DNA组方图质量不及新鲜组织好，组方图的细胞峰较宽，细胞峰CV值较大。

   2、异倍体率较少。由于组方图的细胞峰CV值增大，一些接近于二倍体的DNA异倍体峰位被掩盖。

   3、S期细胞百分比不如新鲜组织的S期计算准确，百分比计数往往偏高，这仍然与细胞峰增宽有关。

   4、DNA二倍体标准不稳定。在石蜡包埋肿瘤DNA倍体分析研究中，发现正常组织细胞的DNA含量与鸡红细胞DNA含量比值增大。解决二倍体标准不稳定的办法，可将正常组织与肿瘤组织同时包埋于一个石蜡组织块中，这样，正常细胞作为一个二倍体内标准，能减少DNA倍体分析的误差。