技术文章
Technical articles产品简介:
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有机溶剂(如乙醇等)。人体的脂肪主要有两种:1、储存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、肾、胰腺等部位;2、结构脂肪,如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等),主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类,呈中性。中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等,传统方法采用苏丹染料,最近发现偶氮染料油红O更适合脂肪的染色,油红O是很强的脂溶剂和染脂剂, 较易与甘油三脂结合呈小脂滴状,与磷脂结合力稍差,其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。
油红O染色液(培养细胞专用)主要用于显示人工培养细胞的脂肪变性和类脂质的异常沉着,细胞内出现多数中性脂肪滴,鉴别培养细胞中所发生的变化及其性质,标本不采用含有乙醇的固定液,脂肪的阳性染色结果呈橘黄至红色,但具体颜色因脂质浓度而定。 该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
名称 | 规格一 4×20ml | 规格二 4×50ml | Storage | |
试剂(A): Cell ORO Fixative | 50ml | 100ml | RT | |
试 剂 (B): ORO Stain | B1: ORO Stain A | 12ml | 30ml | RT |
B2: ORO Stain B | 8ml | 20ml | 4℃ | |
按 B1:B2=3:2 比例混合静置, 即为 ORO Stain,可静置 20~40min 或3000rpm 离心 10 分钟,取上清备用。 | ||||
试剂(C): Mayer 苏木素染色液 | 20ml | 50ml | RT | |
试剂(D): ORO Buffer | 20ml | 50ml | RT | |
使用说明书 | 1 份 |
自备材料:
1、60%异丙醇、蒸馏水、PBS 缓冲液或生理盐水
操作步骤(仅供参考):
1、 培养好的细胞样品固定于 Cell ORO Fixative 15~25min。
2、 PBS缓冲液或生理盐水稍冲洗,稍晾干。
3、 60%异丙醇滴洗 20~30s。
4、 滴加油红O染色液密闭染色10~15min。
5、 60%异丙醇稍洗以便去除染液,PBS缓冲液或生理盐水稍冲洗。
6、 Mayer 苏木素染色液复染核2~5min。
7、 (可选)ORO Buffer 1min。
8、 蒸馏水漂洗 8~10min。
9、 晾干,镜检。
染色结果:
中性脂肪 | 橙红色或橘红色 |
细胞核 | 蓝色 |
注意事项:
1、ORO 染色液不够稳定,易产生沉淀,不宜提前配制,可按需配制后采用静置20~40min 或 3000rpm 离心10 分钟,取上清备用。
2、Mayer苏木素染色液复染时间不能过长。
3、染色结果不能长期保存,应尽快观察及照相。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
有效期:12个月有效;常温运输,按要求保存。