酸溶血定性检测试剂盒说明书

产品简介：

红细胞(Red blood cell，RBC)也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，脊椎动物体内通过RBC运送氧气，RBC同时还具有免疫功能。在贫血检查中可通过蔗糖水溶血试验来检测红细胞膜的缺陷，尤其适用于检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmalnocturnal hemoglobinuria,PNH)，该症为获得性红细胞膜缺陷引起的慢性血管内溶血，常在睡眠时加重，可伴发性血红蛋白尿和全血细胞减少。

 酸溶血定性检测试剂盒是利用PNH红细胞对补体敏感性增高，在酸化的血清中经过37℃孵育，易溶血，血清经过56℃加热30min，使补体灭活，病人红细胞不溶解，该试剂盒主要用于检测人、动物血液的红细胞膜的缺陷，尤其用于鉴定阵发性睡眠性血红蛋白尿症。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。 

自备材料：

1、生理盐水

2、与患者同血型的正常新鲜血液

3、水浴锅

操作步骤(仅供参考)：

1、制备脱纤维血清：取患者和与患者同血型的正常人静脉血 5ml，慢慢注入含有3个洁净玻璃珠的小容器中，立即轻轻的持续摇动，直至纤维蛋白出现并附着于玻璃珠上为止(一    般需要 10～15min)。转移脱纤维血至洁净离心管，低速离心，取上清待用，即为脱纤维血清。

2、制备50%红细胞悬液：取脱纤维血清，经生理盐水洗涤3次，每次都应颠倒、混匀、离心，尽量吸弃上清液，留下红细胞沉淀，加入等体积 PNH NaCl Buffer 重新悬浮红细

胞，即为50%红细胞悬液。

3、取试管6支，按下表先加入同血型正常人新鲜血清0.5ml，其中 3、6两支试管在 56℃

水浴30min，使补体灭活，其余4管置于室温 30min。此后按下表顺序操作。

注意：如果PNH 患者第3管(加正常人灭活血清管)溶血，则说明此溶血不依赖于补体，故不是PNH，可能是红细胞有其他缺陷(如球形红细胞增多症)，应做进一步鉴别。

参考区间：正常人无溶血。

注意事项：

1、 所用器具必须洁净干燥，以免溶血造成假阴性。

2、 血清酸化后应注意密闭保存，尽快检测，避免CO2逸出导致血清酸度降低，影响溶血程度。

3、 如果患者多次输血，其血液中的不正常细胞会相应减少，可呈弱阳性或阴性。出现这种情况应延长孵育时间至 4～6h，再观察溶血情况。

4、 该实验可作为PNH的过筛实验，阴性可排除 PNH，阳性应做酸化溶血实验证实。

有效期：6个月有效。