Jurkat,，人急性T淋巴细胞白血病细胞说明书

仅供科研使用，不可用于临床诊断和治疗

冻存细胞接收后的处理：

1）干冰运输，收到细胞后推荐直接复苏1管，另一管放入-80度冰箱保存过夜后转入液氮，细胞直接转入液氮暂存可能导致细胞复苏率降低。

2）收到细胞后，若发现干冰已经挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

注：收到冻存细胞后请先复苏一管，如有问题请及时反馈，我们指导您复苏第二管，请勿2管一起复苏。

复苏细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

2）在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片2~3组以及培养瓶外观照留存。

3）75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，镜检观察细胞密度未达到80-90%时，将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1000rpm离心5min，离心后弃去上清，用新鲜培养基重悬后加入T25培养瓶或60mm皿中，补加适量培养基，T25培养瓶加6-8ml培养基。

4）如您收到细胞7天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

注：发货用培养基不可再次用来培养细胞

细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①收集所有细胞悬液，1000rpm离心5min，小心弃去上清；

②加1-2ml新鲜培养基吹匀重悬后按照1:2比例加入2个T25培养瓶或60mm皿中，补加适量培养基，T25培养瓶加6-8ml培养基；

注：第一次传代推荐1:2传代，后续可根据细胞生长以及客户需求自行确定。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml新鲜培养基吹匀，将细胞悬液加入T25培养瓶或者60mm培养皿中，补加适量培养基，T25培养瓶加6-8ml培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存

①收集所有细胞悬液，可细胞计数，1000rpm离心5min，弃上清；

②加入配制好的冻存培养液重悬细胞，冻存液的添加量按细胞最终浓度为1~10×10⁶/ml添加。

③将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。