技术文章
Technical articles主要用途
石蜡切片黑色素去色(bleach)试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法的基础上,通过氧化剂处理,使黑色素由棕色变成无色,来识别存档中的石蜡包埋组织切片中黑色素成分的而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于各种石蜡包埋组织切片中的黑色素成分,尤其是肿瘤细胞的黑色素去色检测。产品即到即用,操作简捷,性能稳定,去色明显。
保存方式
保存在4℃冰箱里;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月
用户自备
小型染色缸:用于组织染色操作
烘箱:用于脱蜡处理
光学显微镜:用于组织染色后观察分析
实验步骤
一、 脱蜡处理
1. 取出10片待测的石蜡包埋的5微米厚组织切片
2. (选择步骤)放进80℃烘箱,孵育30分钟
3. (选择步骤)室温下静置15分钟
4. 按下表依次放进小染色缸里孵育
1. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
二、 去色处理
1. 小心加上500微升氧化液(Reagent F),铺满整个样品表面
2. 室温下,孵育5分钟(注意:可以延长至2小时,例如眼晴组织)
3. 小心移去切片上的氧化液(Reagent F)
4. 室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent E)中孵育2分钟
5. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
6. 小心加上200微升去色液(Reagent G),铺满整个样品表面
7. 室温下,孵育1至2分钟,或直至无色
8. 小心移去切片上的去色液(Reagent G)
9. 室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent E)中孵育2分钟
10. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
11. (选择步骤)复染(注意:建议使用通用型苏木素伊红染色试剂盒-GMS10030)
12. 透明处理
13. 放上盖玻片或封片
14. 即刻在一般光学显微镜下观察:
黑色素――浅棕或深棕色变成无色(见附图)
细胞核――蓝色(复染
注意事项
1. 本产品为50次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 脱蜡试剂可以重复使用
4. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全
5. 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面
6. 氧化液(Reagent F)孵育时间5分钟至2小时不等,皮肤组织为5分钟,眼睛组织为2小时
7. 组织细胞染色完成后,即刻进行光学显微镜观察
8. 本公司提供系列组织生物化学成分染色分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定去色明显