冰冻切片总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒产品说明书

主要用途

冰冻切片总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂是一种旨在通过荧光染料菲律宾（FILIPIN）特异性与胆固醇结合，形成复合体，并产生蓝色荧光现象的经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于冰冻切片组织游离胆固醇分布的检测。广泛用于组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，荧光清晰。

产品内容

清理液（Reagent A）  毫升

固着液（Reagent B）  毫升

抗干扰液（Reagent C）  毫升

染色液（Reagent D）  毫升

产品说明书  1份

保存方式

保存染色液（Reagent D）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月

用户自备

荧光显微镜：用于样品染色后观察分析

实验步骤

一、 样本固着处理

1． 取出待测的5至10微米厚的冰冻切片（注意：使用快速冷冻处理－snap frozen的冰冻切片，不宜使用包埋处理）  

2． 小心加上xx微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个样品表面

3． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

4． 重复实验步骤2至3二次

5． 小心加上xx微升固着液（Reagent B），铺满整个样品表面

6． 室温下孵育30分钟

7． 小心移去切片上的固着液（Reagent B）

8． 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗样品表面

9． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

10． 重复实验步骤8至9二次

二、样本染色处理

1． 小心加上xx微升抗干扰液（Reagent C），铺满整个切片样品表面

2． 室温下孵育10分钟

3． 小心移去切片上的抗干扰液（Reagent C）

4． 小心加上xx微升染色液（Reagent D），铺满整个切片样品表面

5． 室温下孵育30分钟，避免光照

6． 小心移去切片上的染色液（Reagent D）

7． 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗样品表面

8． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

9． 重复实验步骤7至8二次

10． 即刻放上盖玻片或封片

11． 在荧光显微镜下观察：激发波长：340nm；散发波长：430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光

注意事项

1． 本产品为50次操作

2． 操作时，须戴手套

3． 操作时，避免污染母液

4． 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面

5． 样品染色完成后，即刻进行荧光显微镜观察 

6． 荧光容易受到光漂白（photobleach），建议使用抗淬灭剂Ⅰ－12058.2

7． 本产品染色后，可用于电镜分析

8． 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品

质量标准

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定荧光清晰