技术文章
Technical articles产品简介:
痰液、体液、粪便等组织样本是常用的微生物学检验样本,常含有多种微生物成分,且 自身成分复杂,由于结核分歧杆菌对营养的要求高、生长缓慢,培养时若标本中含有其他杂 菌,杂菌一般生长较快、易消耗营养,不利于结核分歧杆菌的检出,因此对于可能含有杂菌 的样本(如痰标本、消化道标本、支气管肺泡灌洗液和经支气管吸出液等),培养前均需要对 其进行前处理以液化标本、杀死杂菌;尿液、尸检组织和其他任何污染的液体标本,均需在 培养前进行去污处理,而血、脑脊液、关节液等来自机体无菌部位的无杂菌污染的标本,可 以直接离心后取沉淀接种。常用的标本前处理消化试剂有硫酸、氢氧化钠、N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC)、苯扎溴铵、 草酸、胰酶、二硫苏糖醇(DTT)等,Leagene 痰消化液(分支杆菌专用型)主要由N-乙酰-L-半胱氨酸、氢氧化钠和柠檬酸钠等组成,经无菌处理,可直接用于含结核杆菌的痰液样本的均质化操作。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
编号 名称 | 规格一 100ml | 规格二 500ml | Storage |
试剂 A:柠檬酸钠缓冲液 | 100ml | 500ml | RT |
试剂 B:N-乙酰-L-半胱氨酸 | 0.5g | 2.5g | RT |
使用说明书 | 1 份 |
自备材料:
1、痰液、体液、粪便等组织样本
2、生理盐水、PBS
3、接种环
4、离心管、离心机
5、培养基
6、剪刀、研钵
操作步骤(仅供参考):
配制痰消化液(NALC 溶液):称取0.5g NALC 加入到100ml 的柠檬酸钠缓冲液,*溶解,即成0.5%的NALC 溶液;该溶液可4 度保存,24~48h 有效。
(一)痰液样本:
1、挑起约 5ml 浓痰液至已标记的 50ml 离心管中。
2、加入等量的痰消化液进行均质化处理,涡旋震荡 20s,30~37℃静置 15~20min。
3、加入无菌 PBS(pH6.8 左右)至约 50ml,3000r/min 离心 15min。
4、倒掉上清液,添加 PBS 1~3ml 。(二)体液样本:
1、 无菌体液直接接种,取 10ml 体液于离心管中离心,取沉淀物直接接种。
2、 污染的体液操作同痰液标本。(三)组织样本:
1、取 1g 组织用剪刀剪碎加入 5ml 培养基,用研钵将组织制作成匀浆,加入 50ml 离心管。
2、以下操作同痰液标本。(四)粪便样本:
1、取 1g 粪便加入到 50ml 离心管中,并向其中加入 5ml 培养基,混匀。
2、以下操作同痰液标本。
注意事项:
1、 痰液样本易在清晨采集,采集前先以冷开水充分漱口,以免口腔正常菌群污染样本。
2、 尿液样本易收集早晨第一次尿的中段尿为宜。
3、 样本采集后应立即送检。
4、 如样本用于结合杆菌的检查,痰量要多。
5、 肺部感染的样本可能患有菌血症,应同时做血液培养。
6、 NALC 溶液应根据使用量酌量配制,不易长期保存。
7、 结核菌有传染性,需小心操作,以防感染。
有效期:12 个月有效;室温保存,NALC 溶液 4℃可短期保存。