说说金年会备用网址 的洗涤方法

　　金年会备用网址 运用双抗体夹心ELISA法定量测定兔血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养、上清液和其他生物液体中兔血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒含量。

　　将兔血管紧张素转化酶(ACE)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的兔血管紧张索转化酶(ACE)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的兔血管紧张索转化酶(ACE)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄颜色。颜色的深浅和样品中的兔血管紧张索转化酶(ACE)呈正相关。用酶标仪在450m波长下测定吸光度(0.D.值)，计算样品浓度。

　　金年会备用网址 的洗涤方法：

　　1、自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。

　　2、手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。

　　3、加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

　　4、弃去液体，甩干，每个孔中加入DetectionAb工作液100μl(在使用前15分钟内配制)，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。

　　5、弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl/每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

　　6、每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。

　　7、弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。

　　8、每孔加底物溶液100μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止)。

　　9、每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄颜色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

　　10、立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。

　　11、实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。