主要用途
凝血酶原时间(PT)检测试剂是一种旨在通过组织因子替代反应物,与血浆样品混合后,加入钙离子启动凝血反应,产生凝块,通过分光光度仪检测,来测定样品中凝块形成时间的经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体血浆样品凝血系统的检测,以及凝血因子和抑制剂的的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
产品内容
抗凝液(Reagent A) 毫升
反应液(Reagent B) 管
稀释液(Reagent C) 毫升
标准液(Reagent D) 微升(另购)
产品说明书 1份
保存方式
保存标准液(Reagent D)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反应液(Reagent B)一旦启用,保存在-20℃冰箱里;有效保证3月
用户自备
2毫升离心管:用于样品操作的容器
1.5毫升离心管:用于样品反应的容器
微型台式离心机:用于样品操作
培养箱或恒温水槽:用于反应物孵育
计时器:用于反应计时
比色皿:用于样品凝血仪测定的容器
凝血仪:用于样品凝块形成分析
实验步骤
- 血浆制备
- 准备好2毫升离心管(注意:1小时内完成后续操作)
- 加入xx微升抗凝液(Reagent A)
- 抽取xx毫升血液到含抗凝液(Reagent A)的离心管
- 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为3000g
- 小心移取上层黄色液体到新的2毫升离心管――此为血浆成分(注意:避免触碰白色液体层)
- 即刻置于冰槽里备用(注意:2小时内使用)
- 测定准备
- 准备好上述制备的血浆样品
- 设定好凝血仪并预热
- 实验开始前,移出xx毫升稀释液(Reagent C)到反应液(Reagent B)管里,混匀后,标记为反应工作液,然后移出200微升到新的1.5毫升离心管,置于37℃恒温培养箱里孵育30分钟,其余的即刻放进-20℃保存备用
- 凝血测定(手工操作)
- 准备好1个1.5毫升离心管
- 加入100微升上述制备的待测样品,混匀
- 放进37℃培养箱里孵育3分钟(注意:不宜超过5分钟)
- 即刻加入上述孵育的200微升反应工作液;同时开启计时器进行计时(注意:以秒计时)
- 倾斜离心管观察凝块形成,直至液体凝固;同时关闭计时器结束计时
- 正常参考范围:
手工操作:11至15秒
凝血仪操作:10至13秒
注意事项
- 本产品为20次操作,包括标准对照测定
- 操作时,须戴手套
- 血液采集,避免使用肝素、EDTA抗凝管
- 样品避免溶血,采血避免损伤组织
- 溶血、脂血、肠胃外喂养(parenteral feeding)样品或血浆中含有肝素、纤维蛋白(fibronogen)、狼疮抗凝物(lupus anticoagulant;LA)、水蛭素(Hirudin)等则干扰检测
- 血浆样品避免反复冻融:4℃环境维持4小时;-20℃维持2月;-80℃维持6月
- 标准液(Reagent D)为标准对照血浆
- 建议用户使用正常对照样品,建立自己的正常参考值范围
- 用户可以使用各种自动和半自动凝血仪:例如Sysmex CA 7000等进行检测,按照仪器操作手册操作
- 用户可以使用660nm波长的光度仪进行检测
- 本公司提供系列血液凝集检测试剂产品
质量标准