葡萄糖检测试剂盒(Folin-Wu 微板法)检测原理是葡萄糖在加热的碱性环境中铜离子还原成氧化亚铜沉淀，后者使磷钼酸还原成钼蓝，使溶液呈蓝色，颜色深浅与葡萄糖含量成正比，其最高吸收峰为 420nm，利用酶标仪测定样品和标准品的吸光度值，通过公式可以计算出样品的葡萄糖含量，本试剂盒可用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织、细胞培养基等样本中的葡萄糖含量定量测定。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

自备材料：

1、蒸馏水、PBS、生理盐水

2、离心管、96 孔板

3、水浴锅

4、酶标仪

操作步骤(仅供参考)：

1、样本处理：

①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血，一般需要去除蛋白质(即为无蛋白血滤液)后再经检测。取抗凝血 0.1ml，加入 0.7ml 蒸馏水和 0.1ml 蛋白酸化液，混匀，缓慢加入 0.1ml 蛋白沉淀液，边加边摇匀，至出现暗红色蛋白质沉淀，静置 10min，3000g 离心 5min，取上清液即为无蛋白血滤液，4℃保存备用。

②组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或 PBS(ml)=1：9 的比例，加入生理盐水或PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆，2500~3000g 离心 10min，取上清待用。

③细胞样本：

a、取适量的细胞(一般推荐>106 以上)，1000g 离心 10min，弃上清，留取沉淀。b、用 PBS 或生理盐水清洗 1~2 次，1000g 离心 10min，弃上清，留取沉淀。

c、加入 200~300μl 的 PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率 300W，每次 3~5s，间隔 30s，重复 3~5 次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心；亦可用 1~2% Triton X-100 冰浴 30~60min，制备好的裂解液不可离心。

2、制备 Glu 标准应用液（0.55mmol/L）：取 10ul Glu 标准储存液(55mmol/L)，补加蒸馏水或者无菌水 990ul，充分混匀即可。根据需用量，临用前按比例配置，不宜久存。

3、Glu 加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡，如果样品中的 Glu 浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

充分混匀, 置于沸水浴煮沸 8min，取出，在冷水中冷却，注意不能摇动，静置 10min， 分别加入 750μl 蒸馏水。

4、Glu 测定：取 200μl 上述溶液，加入 96 孔板中，以空白孔调零，用酶标仪在 420nm 处读取标准孔和测定孔的吸光度。

计算：葡萄糖含量(mmol/L)=(测定管吸光度/标准管吸光度)×0.55×10

=(测定管吸光度/标准管吸光度)×5.5 其中 10 为去蛋白样品的稀释倍数

注意事项：

1、 待测样本如不能及时测定，应置于 2~8℃保存，3 天内稳定。

2、 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。

3、 Glu 标准应用液临用前按比例配置，不宜久存。

4、 如样品吸光度值偏大，则需再次稀释后重新检测。

5、 样品中含有蛋白等干扰物质时，须用去蛋白的方法处理后再行检测。

6、 煮沸时不能动摇。

有效期： 6 个月有效。4℃运输，4℃保存。