技术文章
Technical articles产品简介:
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus 在1946 年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该技术不仅能显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff 试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。
糖原PAS 染色液(真菌专用)利用真菌含有多糖,经过碘酸氧化暴露出醛基,醛基与无色Schiff 结合呈现红色。该染色法性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需0.5h; 低浓度过碘酸更适用于真菌染色,无盐酸乙醇分化液分化步骤。
产品组成:
自备材料:
1、蒸馏水
2、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、常规固定(常采用 10%中性福尔马林), 常规脱水包埋。脱蜡至水。
2、入过碘酸溶液,室温氧化 5~10min。
3、自来水冲洗 2 次,蒸馏水浸洗 2 次。
4、入 Schiff Reagent 并加盖,置于室温阴暗处浸染 10~20min。5、亚硫酸钠溶液滴洗 2 次,每次 2min。
6、流水冲洗 2min。
7、Mayer 苏木素复染核 2~5min。
8、流水冲洗 5min。
9、常规脱水透明,中性树胶封固。
染色结果:
真菌 紫红色
细胞核 蓝色
备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent 中作用时间的长短。
阴性对照(可选):
1、取淀粉酶 1g 溶解于 PBS(pH5.3) 100ml,处理 30~60min,与其他样本共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。
2、(备选方案)取唾液片(过滤后用)处理 30~60min,与其他样本共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。
3、(备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入 Schiff
Reagent。结果应为阴性。
注意事项:
1、过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以 18~22℃最佳。
2、过碘酸溶液、Schiff Reagent 使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前最好提前
30min 取出恢复至室温,避光暗处使用。
3、过碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、细胞或组织的类别等决定。
4、如常规切片建议用糖原PAS 染色液(DG0005),其过碘酸和苏木素浓度都相对高。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 个月有效。