体液氧化应激活性氧鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒说明书

主要用途

      体液氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法定量检测试剂是一种旨在通过自由基探针鲁米诺和强化剂的参与下，体液样品中的活性氧族使发光物氧化降解并发光，在化学发光仪（Luminometer）的帮助下定量检测样品中活性氧族（过氧化氢）的生成和数量的经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种体液包括尿液、脑脊液、唾液、精液、羊水等各种体液的活性氧族的检测。产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定，检测敏感。

产品内容

清理液（Reagent A）      毫升

强化液（Reagent B）      毫升

发光液（Reagent C）      毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存强化液（Reagent B）和发光液（Reagent C）在－20℃冰箱里，严格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

台式离心机：用于去除样品杂质

测试管：用于发光检测用的试管

化学发光仪：用于检测化学发光

实验步骤

• 样品预处理
• 准备好1.5毫升离心管
• 移取1毫升液体到离心管 
• 放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心移取上清液到新的1.5毫升离心管
• （选择步骤）放进－70℃冰箱里保存
• 放进37℃培养箱里备用（1小时内）
• 测读

    测读开始前，打开化学发光仪，设定仪器内温度为37℃预热和整合测读10秒或 15分钟；然后关掉实验室的灯光。将－20℃冰箱里的试剂置入冰槽里融化，严格置于暗室里。然后进行下列操作。

• 准备好测试管，做好标记：阴性对照、样品本底和样品活性
• 移取xx微升清理液（Reagent A）到阴性对照测试管
• 移取400微升上述预处理的待测体液到样品本底测试管
• 移取400微升上述预处理的待测体液到样品活性测试管
• 分别加入xx微升强化液（Reagent B）到上述测试管，除样品本底测试管外
• 分别加入xx微升发光液（Reagent C）到上述测试管，除样品本底测试管外
• 轻轻涡旋混匀
• 即刻放进37℃化学发光仪里测读
• 整合测读10秒，获得相对发光单位（relative light unit；RLU）
• 或者整合测读15分钟，获得光电子读数：
• 计算ROS水平：

 注意事项

• 本产品为50次操作
• 如果测定体系变化，则试剂用量相应变化
• 操作时，须戴手套
• 测试前，体液须新鲜收集，1小时内比较佳
• 样品制备后即刻测读，不宜过夜保存
• 必要时，例如活性氧族过低，可以浓缩样品处理
• 测读的所有步骤均须在暗室里进行
• 如果是注射式化学发光仪，建议测试前后使用无离子水冲洗化学发光仪注射（injector）管道
• 本公司提供系列活性氧分析试剂产品

质量标准

• 本产品经鉴定性能稳定
• 本产品经鉴定检测敏感