尿蛋白检测试剂盒（丽春红比色法）说明书

产品简介：

在尿液样本中加入蛋白沉淀剂和丽春红S，离心，蛋白质-染料复合物被沉淀下来，将沉淀物加入碱性溶液溶解后，分光光度法检测560nm处吸光度，计算蛋白含量。Leagene 尿蛋白检测试剂盒(丽春红比色法)主要用于定量检测尿液中蛋白含量，较双缩脲法灵敏，对白蛋白的敏感性比球蛋白要高。

 产品组成：

自备材料：

1. 蒸馏水
2. 离心管、试管
3. 比色杯、分光光度计

操作步骤(仅供参考)：

1. 取适量丽春红S试剂(10×)，按1:9加入蒸馏水，稀释至1×，室温可保存2～3个月。
2. 取1ml蛋白标准配制液加入到蛋白标准(BSA)中，充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
3. 取适量20mg/ml蛋白标准，稀释至浓度分别为0、200、400、600、800、1000、1200、1600μg/ml或所需浓度。特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中；例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取20mg/ml蛋白标准溶解于蔗糖中，一般也可以用0.9%NaCl或PBS作为溶解BSA稀释液。稀释后的蛋白标准也应-20℃长期保存。
4. 制作蛋白标准曲线： 各取100μl上述稀释度的蛋白标准， 与测定样本操作相同（见第6步） 。”0”号管空白调零，比色杯光径1cm，560nm比色，制成标准曲线。

       5.半定量实验：取3～5ml新鲜尿液转移入小试管，滴加磺基水杨酸溶液3～4滴，形成界  面，立即观察，如有浑浊，提示尿液中含有蛋白质，浑浊深浅表示含量多少。​

        6.取离心管，根据上述半定量实验测得的蛋白浓度按下表要求加入待测样本和蒸馏水，再加入1ml 1×丽春红S试剂，混匀。3500g离心10min，将上清缓缓倒出后，倒置于滤纸上数分钟，用滤纸条吸附管壁上多余的试剂(勿触及管低沉淀)。再加入2ml Alkaline Buffer至沉淀中，充分混合使沉淀溶解。