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使用层析柱时需注意这些

更新时间:2020-10-15点击次数:1112
  层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。凝胶过滤层析是利用一定大小孔隙的具有网状结构的凝胶作层析介质(如葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等),根据被分离物质的分子大小、形状不同扩散到凝胶孔隙内的速度不同,因而通过层析柱的快慢不同而分离的一种层析法。
  所有的层析系统都由两个相组成:一是固定相,它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分;另一是流动相,即可以流动的物质,如水和各种溶媒。适用于分子筛、离子交换、凝胶渗透与亲和层析。随着液相层析法进入血液制品生产,利用层析法,可纯化血浆中多种蛋白,例如白蛋白等等。
  层析柱的使用注意事项:
  1、除氯化的碳氢化合物(二氯乙烷、三氯甲烷)。丙酮、酮类化合物、脂肪族脂和苯酚之外,其他的所有有机溶剂均可适用。
  2、胶要洗干净,如果柱子里面残留蛋白的话,在混匀过程中会产生大量气泡,影响柱效。
  3、禁止使用浓度大于10%的氢氧化钠,10%的盐酸或5%的醋酸溶液,因上述溶液会损坏尼龙网筛。
  4、柱子一定要垂直,做重锤线,然后装柱器上端气泡一定要排除,如不排除那么水流就不是均一的。
  5、装柱前上下两端气泡一定要先排尽,下端要先用水润一下防止在加胶过程产生气泡。
  6、沉降过程不要太长(半小时足矣),胶在使用多次后有些胶颗粒已经失效,大小已经不是均一的,所以如果放任让其自由沉降太长,整个柱子就不是均一的。
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