原卟啉（FEP）检测试剂盒（荧光比色法）

产品简介：

原卟啉(Protoporphyrin IX)分子量为 562.66，CAS 号为 553-12-8，在生物体内原卟啉的含量可间接反应铁的缺乏与否。原卟啉(FEP)检测试剂盒(荧光比色法)是利用酸化液破坏红细胞并提取原卟啉(FEP)，后者在紫外线照射下会发出荧光，可通过荧光分光光度计等测定 FEP 含量，该试剂盒主要用于检测人、动物血液的红细胞内游离原卟啉(FEP)的测定，反映缺铁性贫血的程度，但应事先或者事后检测相应的红细胞比容。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

试剂(A): 肝素钠溶液(125U/ml) 0.5ml -20℃

试剂(B): 原卟啉Ⅸ标准(5mg/L) 1ml  -20℃ 避光

试剂(C): FEP 酸化液               2×100ml  RT

使用说明书                       1 份

自备材料：

1、 生理盐水

2、漩涡振荡器、离心机

3、荧光分光光度计

操作步骤(仅供参考)：

1、配制肝素抗凝全血：按新鲜全血：肝素钠溶液(125U/ml)=9：1 配制。

2、配制原卟啉Ⅸ标准工作液(50μg/L)： 室温溶解原卟啉Ⅸ标准(5mg/L)，取 10μl 加至990μl 的 FEP 酸化液，混匀，即为原卟啉Ⅸ标准工作液(50μg/L)，4℃可保存 1 周。

3、按下表进行操作，并以生理盐水作为空白对照

                           空白管     标准管   待测管

肝素抗凝全血                                      —            —          0.05

原卟啉Ⅸ标准工作液(50μg/L)        —           0.05       —

生理盐水                                                 0.05           —      —

FEP 酸化液(ml)                                 3.5          3.5     3.5

4、置于漩涡振荡器上振荡 2～3min，3000 r/min 离心 6min，取上清。

5、荧光分光度计进行荧光度测定(激发滤片 400nm，发射滤片 600nm)，以空白管作为调零点，标准管校荧光强度并调至 100，读取待测管的荧光强度读数(Fu )。

6、另用该肝素抗凝全血测红细胞比容(PCV )，红细胞比容常采用临床检验科的血细胞自动分析仪进行测定。

结果计算：FEP(μg/L,RBC)=35×(Fu/PCV )

参考区间： 正常人: (398.4±131.7)ug/L RBC

注意事项：

1、 整个操作均应在避光条件下进行，并尽快完成。

2、 原卟啉在强光下易分解，收集好的血液样本应立即 4℃避光保存，24h 以内用完。

3、 荧光强度会随着时间的延长而逐渐衰退，但 2h 以内基本稳定。

4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：6 个月有效。